问题：
蛋白质分离的主要方法及其原理
答案：
( 1 ) SDS-PAGE 在 PAGE 系统中引进 SDS (十二烷基硫酸钠)。 SDS 会引起多肽的变性,并使蛋白带负电荷,由于多肽结合 SDS 的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关,因此 SDS 多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关。当分子量在 15kD 到 200kD 之间时,蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系,符合 logMW=K-bX ,式中: MW 为分子量, X 为迁移率, k 、 b 均为常数,若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图,可获得一条标准曲线,未知蛋白质在相同条件下进行电泳,根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。 ( 2 ) HPLC 色谱柱内填充细小而均匀的固体颗粒作为固定相,如 C18 ;在高压泵的驱动下,流动相携带各种蛋白质分子流经固定相,蛋白质分子与固定相发生相互作用(非共价性质),由于蛋白质分子间存在性质和结构上的差异,导致它们与固定相之间产生不同的作用力,不同组分依据被固定相保留的时间不同顺序流出色谱柱,通过检测器就可以得到不同的峰信号,每个峰都代表一个组分。 ( 3 ) HPCE 该技术以高压电场为驱动力,以毛细管为分离通道,依据样品中各组分之间迁移率和分配行为的差异而实现分离的一种高效液相分离技术,兼有凝胶电泳及高效液相色谱的优点。