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问题:

试述“克隆”的基本概念并举例说明其在细胞培养工作中的实际意义。

答案:

1)克隆:指通过一定方法获得由单个细胞无性繁殖形成的细胞集落。
2)实际意义:
A.检验医学诊断试剂:单克隆抗体以其特异性强、纯度高、均一性好等优点,广泛应用于酶联免疫吸附试验、放射免疫分析、免疫组化和流式细胞仪等技术。
目前,单克隆抗体商品化试剂盒广泛应用于:
①病原微生物抗原、抗体的检测;
②肿瘤抗原的检测;
③免疫细胞及其亚群的的检测;
④激素测定;
⑤细胞因子的测定。
B.蛋白质的提纯:单克隆抗体是亲和层析中重要的配体。将单克隆抗体吸附在一个惰性的固相基质上,并制备成层析柱。当样品流经层析柱时,待分离的抗原可与固相的单克隆抗体发生特异性结合,其余成分不能与之结合。将层析柱充分洗脱后,改变洗脱液的离子强度或pH,欲分离的抗原与抗体解离,收集洗脱液便可得到欲纯化的抗原。