问题:
试述Gram Stain染色法的步骤、实验结果、原理及其意义?
答案:
答:(1)染色步骤: a、初染:将结晶紫染液滴加到已固定的标本片上,染色1min,水洗干燥;b、媒染:滴加碘液媒染1min,水洗干燥;c、脱色:滴加95%的酒精脱色,一般脱色30s,水洗干燥;d、复染:滴加复红复染1min,水洗干燥,用油镜观察。 (2)结果:呈紫色者为革兰阳性菌,呈红色者为革兰阴性菌。 (3)原理:细菌经结晶紫初染和碘液媒染后,细胞膜和原生质染上了不溶于水的结晶紫-碘复合物。革兰氏阴性菌细胞壁含脂类较多,当用95%乙醇脱色时,脂类被溶去,而肽聚糖少且疏松,不易收缩,形成较大的孔隙,结晶紫-碘复合物极易被脱出,最后被红色染料复红复染成红色。革兰氏阳性菌的细胞壁含脂类少,肽聚糖多且紧密,95%乙醇作用后肽聚糖收缩,细胞壁孔隙缩小,结晶紫-碘复合物不能脱出,经红色染料复红复染后仍为紫色。(4) 实际意义:a鉴别细菌:将细菌分为G