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问题:

说明对不同细胞进行分离所用方法的基本原理。

答案:

参考对不同细胞进行分离的技术有离心、流式细胞术、显微切割和免疫磁珠技术。离心分离技术分为速度沉降和等密度沉降。速度沉降分离法主要是根据细胞大小分离细胞。它所采用的介质最大密度应该小于被分离细胞的最小密度。细胞在单位重力作用下通过密度介质,或者在低离心力作用下通过梯度密度溶液(如蔗糖等)沉降。细胞大小不同,它们的沉降速度也不同,细胞越大沉降越快。适用于分离大小差异比较明显的细胞。等密度沉降分离法是根据细胞密度差异来分离细胞的。细胞在连续密度梯度的分离介质中经强离心力和足够长的时间,最后沉降或漂浮到与其密度相等的介质层面,并停留在那里不再移动,形成沉降带,各沉降带分别收集,从而将不同密度的细胞分离。在非连续密度梯度中,被分离的细胞主要停留在介于其自身密度上下的两种密度介质交界面上。流式细胞仪的工作原理是先用荧光染料偶联的抗体标记待分离的细胞,然后将细胞放入样本管中,细胞在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由喷嘴喷出,形成极细的微滴,每微滴至多含一个细胞。经激光照射,微滴中的细胞被激光激发产生荧光。仪器中的一系列光学系统收集信号,计算机系统进行收集、储存。